Ультрафильтрация может сохранить биологическую активность и сэкономить время
Ультрафильтрация может сохранить биологическую активность и сэкономить время. Технология очистки белка развивалась от различных методов химического осаждения для обогащения проб или методов диализа для замены буфера до системы очистки с поперечным потоком, управляемой давлением, с использованием ультрафильтрационной мембраны. Технология ультрафильтрации (УФ) основана на использовании полимерных мембран с высоким-уровнем определенного размера пор для разделения молекул по размеру. Короче говоря, на этапе ультрафильтрации (УФ) используется давление жидкости для обеспечения переноса более мелких молекул через ультрафильтрационную (УФ) мембрану и одновременного перехвата более крупных молекул.
Метод химического осаждения можно использовать для концентрирования образцов белка. Разделение на основе ультрафильтрации больше основано на механическом воздействии, чем на химической реакции. Исследователи могут концентрировать образцы без добавления денатурированных растворителей или солей. Замена буфера с использованием технологии диализа использует большое количество буфера. Поскольку единственной силой, действующей на растворитель, является сила диффузии, процесс будет продолжаться несколько дней. Предварительно собранное и простое-в-использовании устройство для ультрафильтрации может быстро выполнять этапы концентрирования или замены буфера без громоздкого процесса обработки, необходимого во многих других технологиях.
Ультрафильтрация может быть реализована в любом из следующих двух режимов работы: прямоточная фильтрация (DFF) или тангенциальная фильтрация (TFF, рис. 1). DFF хорошо влияет на процесс очистки малых потоков (до 30 мл) с помощью центробежного устройства, но на технологию DFF отрицательно влияет проблема закупорки мембраны. Чтобы уменьшить образование коллоидного слоя, можно использовать конфигурацию с плавающим стержнем мешалки (емкость для перемешивания) или можно создать поперечный поток на входной стороне диафрагмы путем создания контролируемого ламинарного потока. Работа мешалки может улучшить эффект ультрафильтрации, но все еще существуют ограничения для получения наилучших характеристик. Потому что скорость перемешивания и уровень времени зависят от диапазона поворота тела стержня, и этот диапазон будет меняться с изменением радиуса поворота.