CM Слабая ионная-мембранная хроматография

SP Сильная катионообменная мембранная хроматография. Знакомство с продуктом. 

 

2. Преимущества продукта

Быстро и эффективно. Высокая связывающая способность может быть достигнута при скорости потока, которая в 40 раз выше, чем при традиционной хроматографии на смолах. По сравнению с обычной хроматографией на основе смол- время процесса при использовании мембранной хроматографии можно сократить в 30–40 раз. Типичный рабочий расход составляет около 10 МВ/мин.

2.2 Высокая эффективность связывания Мембранная хроматография демонстрирует высокую связывающую способность и высокие скорости потока при низком перепаде давления, что позволяет захватывать заряженные биомолекулы за один проход через модуль.

2.3 Масштабируемость и гибкость Полный спектр продуктов для мембранной хроматографии может удовлетворить разнообразные потребности в очистке биомолекул, охватывая области применения: от разработки процессов до крупномасштабного-производства. Конструкция капсулы допускает одноразовое-использование или возможность очистки и повторного использования после надлежащих процедур очистки.

2.4 Повышенная производительность Компактная конструкция сводит к минимуму занимаемую площадь. За счет исключения таких операций, как упаковка колонки, очистка, проверка очистки и хранение колонки, обработка может начаться после простого уравновешивания с относительно меньшим количеством буфера. Поскольку нет необходимости в упаковке, очистке или хранении колонки, затраты на рабочую силу могут быть снижены более чем на 50%.

 

 

3 технических параметра

3.1 Конструкционные материалы

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
объем мембраны	0,2 мл	5мл	140мл	5L
Мембранная опорная структура	Полипропилен
мембранный корпус	Полипропилен
уплотнительное кольцо	Силикон

3.2 Рабочие характеристики

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
объем мембраны	0,2 мл	5мл	400мл	5L
Рекомендуемый расход	1-6 мл/мин	25-150мл/мин	2-12л/мин	25-150л/мин
Максимальная рабочая температура	35 градусов
Максимальное рабочее давление	3 бар (25 градусов)
Максимальный перепад давления	3 бар (25 градусов)
Условия хранения	20% eтанолaвопросительныйsрастворение

Сравнение показывает, что срок службы мембранной хроматографии SP сравним со сроком службы SP Sepharose 6FF.

Рисунок 1. Изменения связывающей способности мембранной хроматографии SP после многократного использования, протестированного с лизоцимом.

Кроме того, мы оценили эффективность мембранной хроматографии в удалении белков и нуклеиновых кислот клетки-хозяина. Результаты следующие:

	ДНК				медицинский работник
	Восстановление IgG	Содержание (пг/мг IgG) по данным RT-PCR		Фактор удаления	Содержание (нг/мг IgG) от Elisa		Фактор удаления
Бегать	%	До Q-мембраны	После Q-мембраны	Бревно	До Q-мембраны	После Q-мембраны	Бревно
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Таблица 1. Скорость удаления ДНК и белка клетки-хозяина из материала CHO-, экспрессирующего IgG, с использованием SP-мембранной хроматографии

Серия экспериментов продемонстрировала, что мембранная хроматография SP позволяет эффективно удалять загрязнения, сохраняя при этом высокую скорость восстановления целевого IgG.

При сравнении мембранной хроматографии Gudiling SP с импортными марками данные по связывающей способности следующие:

Связываниеcвместительность (мг/мл)	Сарториус	ПАЛЛ	Руководство
Лизоцим	25	32	29
Трипсин	22	27	25

Таблица 2. Характеристики связывающей способности различных белков в нашей продукции и конкурирующих брендах

Общая оценка показывает, что наша связующая способность сопоставима с импортной продукцией.

Рисунок 2. Тест связывающей способности модуля мембранной хроматографии SP с использованием лизоцима в качестве стандарта

По сравнению с динамической связывающей способностью и импортными продуктами было подтверждено, что большинство целевых белков можно захватывать при элюировании лизоцима в 190 мМ NaCl.

При различных условиях элюирования мы обнаружили, что профили элюирования мембранной хроматографии аналогичны профилям элюирования агарозного геля, но чистота белков значительно варьируется при разных концентрациях соли. В реальных исследованиях, разработках и производстве необходимо количественно определить оптимальные условия элюирования для получения целевых белков высокой-чистоты.

 

4 типичных случая применения

Удаление ДНК, вирусов и белков клетки-хозяина

Захват плазмид, вирусов, белков и очистка олигонуклеотидов

Удаление пигментов из дрожжевого ферментационного бульона и захват белка с высокой-емкостью

 

5 Порядок использования

5.1 Подготовка и сборка оборудования:

5.1.1: Установите модуль мембранной хроматографии в хроматографическую систему ÄKTA, следуя процедурам, аналогичным процедурам для колонок со смолой, гарантируя, что направление потока совпадает со стрелками модуля и ориентацией впускного отверстия. Подключите модуль с помощью замков Люэра или зажимных фитингов-для надежной интеграции в систему.

5.1.2 Установите скорость потока подачи на5–10 МВ/мини дегазируйте модуль с помощью уравновешивающего буфера, гарантируя, что выходящие потоки не содержат пузырьков воздуха. После дегазации подсоедините выпуск пермеата к хроматографической системе.

5.2:Обработка-перед использованием:

5.2.1:

Установите скорость потока подачи на5–10 МВ/мини выполните предварительную-обработку с помощью0,5 М NaOH для более 5 МВ, обеспечивая достижение мембраной полного равновесия.

5.2.2: При той же скорости потока выполните предварительную-обработку1 М NaCl для более 5 МВдля обеспечения того, чтобы мембрана достигла полного равновесия.

5.3 Процесс хроматографии

5.3.1 Установите скорость потока питания 5–10 МВ/мин и уравновешивайте мембрану уравновешивающим буфером более 5 МВ до тех пор, пока мембрана не достигнет полного равновесия.

5.3.2 После предварительной -фильтрации с размером пор 0,22 мкм загружают образец на мембрану до тех пор, пока загрузка образца не будет завершена или не будет достигнута хроматографическая связывающая способность.

5.3.3 Промывают уравновешивающим буфером более 10 МВ до тех пор, пока УФ-сигнал не вернется к исходному уровню.

5.3.4 Применяйте градиентное или ступенчатое элюирование в соответствии со схемой процесса и собирайте фракции по мере необходимости.

5.4 CIP-обработка после-использования – устройство для мембранной хроматографии CIP (очистка на месте)

5.4.1 Установите скорость потока сырья 5–10 МВ/мин и выполните очистку 1 М NaOH в течение более 10 МВ до тех пор, пока УФ-сигнал не снизится до уровня ниже базовой линии.

5.4.2 После циркуляции в течение 30 минут перейдите к промывке водой до тех пор, пока pH не достигнет 7–8, затем продолжайте очистку 20% этанолом до тех пор, пока проводимость не станет почти постоянной.

5.5 Хранение мембранной хроматографии

После использования и завершения CIP мембранный модуль можно снять и хранить, замочив в 20 % этаноле, или хранить в -линии при комнатной температуре в растворе, содержащем 20 % этанола. 20% раствор этанола следует периодически проверять и заменять.

 

6. Информация для заказа

Капсульный фильтр для сильной анионообменной мембранной хроматографии Q

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
Модель продукта	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Объем мембраны	0,2 мл	5мл	400мл	5L

горячая этикетка : Слабая ионообменная мембранная хроматография-см, Китай, поставщики, производители, фабрика, оптовая торговля, оптом, в наличии, бесплатный образец