Q Сильная анионная мембранная хроматография

 

2. Преимущества продукта

2.1 Быстро и эффективно - обеспечивает высокую связующую способность при скорости потока, которая в 40 раз выше, чем у традиционных смол. По сравнению с хроматографией на насадочном слое время процесса при использовании мембранной хроматографии сокращается в 30–40 раз. Типичный рабочий расход составляет 10 МВ/мин.

2.2. Высокая эффективность связывания. Мембранная хроматография - демонстрирует высокую нагрузочную способность и высокие скорости потока в условиях низкого перепада давления, что позволяет захватывать заряженные биомолекулы за один проход.

2.3 Масштабируемость и гибкость - полная серия продуктов для мембранной хроматографии может удовлетворить разнообразные потребности очистки биомакромолекул, охватывая все этапы от разработки процесса до крупномасштабного производства. Конструкционная конструкция капсульного-типа позволяет использовать как одноразовое-использование, так и повторное использование после очистки.

2.4 Повышение производительности - Компактная конструкция сводит к минимуму занимаемую площадь. За счет исключения операций упаковки колонок, очистки, проверки очистки и хранения колонок процесс требует меньше буфера для уравновешивания и может выполняться непосредственно без подготовки колонки. Затраты на оплату труда могут быть снижены до 50%.

 

3. Технические параметры

3.1 Конструктивный материал

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
объем мембраны	0,2 мл	5мл	140мл	5L
Структура поддержки мембраны:	полипропилен (ПП)
мембранный корпус	полипропилен (ПП)
уплотнительное кольцо	силикон

 

3.2 Рабочие характеристики

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
объем мембраны	0,2 мл	5мл	400мл	5L
Рекомендуемый расход	1-6 мл/мин	25-150мл/мин	2-12л/мин	25-150л/мин
Максимальная рабочая температура	35 градусов
Максимальное рабочее давление	3 бар (25 градусов)
Максимальный перепад давления	3 бар (25 градусов)
Условия хранения:	20% водный раствор этанола

 

Срок службы мембранной хроматографии Q сравним со сроком службы хроматографии на агарозном геле.

 

 

Рисунок 1. Изменения емкости мембранной хроматографии после многократного использования под контролем BSA.

Кроме того, мы оценили эффективность удаления белков и нуклеиновых кислот клетки-хозяина с помощью мембранной хроматографии. Результаты следующие.

	ДНК				медицинский работник
	Восстановление IgG	Содержание (пг/мг IgG) по данным RT-PCR		Фактор удаления	Содержание (нг/мг IgG) от Elisa		Фактор удаления
Бегать	%	До Q-мембраны	После Q-мембраны	Бревно	До Q-мембраны	После Q-мембраны	Бревно
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Таблица 1. Скорость удаления ДНК и белков клетки-хозяина из материала CHO-, экспрессирующего IgG, с использованием Q-мембранной хроматографии

 

Серия экспериментов продемонстрировала, что мембранная хроматография Q может эффективно удалять примеси, сохраняя при этом высокую степень извлечения целевого IgG.

Кроме того, мы сравнили мембранную хроматографию Gudiling с импортными брендами, и данные о емкости загрузки следующие:

Емкость загрузки (мг/мл)	Сарториус	ПАЛЛ	Руководство
БСА	29	60	45
ДЕРН	25	40	35
Белок А	27	45	40
Трипсин	30	56	44

Таблица 2. Показатели загрузки различных белков в наш продукт и продукцию конкурентов

Общая оценка показывает, что наша грузоподъемность сопоставима с импортной продукцией.

Рисунок 2.Используя модуль Q-мембранной хроматографии, BSA использовали в качестве стандартного белка для оценки связывающей способности. Динамическую связывающую способность сравнивали с импортной продукцией. Результаты показали, что большая часть целевого белка может быть захвачена и элюирована с помощью150 мМ NaClпри использовании БСА в качестве модельного белка.

Используя различные условия элюирования, мы обнаружили, что поведение элюирования при мембранной хроматографии аналогично поведению хроматографии на агарозном геле. Чистота белков, элюируемых при различных концентрациях соли, существенно различается. При разработке и производстве реальных процессов необходимо количественно определить оптимальные условия элюирования для получения целевого белка высокой чистоты.

 

4. Типичный случай применения

Удаление ДНК, вирусов, белков клетки-хозяина (HCP) и эндотоксинов.

Улавливание плазмид, вирусов и белков, а также очистка олигонуклеотидов.

 

5. Порядок работы

5.1: Подготовка и сборка оборудования:

5.1.1: Хроматографическая система AKTA: Установите модуль мембранной хроматографии аналогично насадочным колонкам. Убедитесь, что направление стрелки на модуле соответствует направлению потока сырья. Подключите систему с помощью разъемов Luer или фитингов Tri-Clamp.

5.1.2 Установите скорость потока на входе 5–10 МВ/мин и используйте уравновешивающий буфер для удаления воздуха из системы. Убедившись в отсутствии пузырьков воздуха в выходном потоке, подсоедините выпуск пермеата к хроматографической системе.

5.2:Обработка-перед использованием:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 МВ, чтобы мембрана достигла равновесия.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 МВ, чтобы мембрана достигла равновесия.

5.3 Процесс хроматографии

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 МВ, пока мембрана не достигнет равновесия.

5.3.2 После того, как образец предварительно -фильтруется через фильтр 0,22 мкм, загружайте его в колонку до тех пор, пока не будет нанесен весь образец или не будет достигнута хроматографическая связывающая способность.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 МВ, пока УФ-сигнал не упадет до базовой линии.

5.3.4 Выполните градиентное или линейное элюирование в соответствии с разработанным протоколом и при необходимости соберите фракции.

5.4 CIP-обработка после-использования – устройство для мембранной хроматографии CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 МВ, пока УФ-сигнал не упадет ниже базовой линии.

5.4.2 После циркуляции в течение 30 минут перейдите к промывке водой до тех пор, пока pH не достигнет 7–8, затем переключитесь на 20% этанол и продолжайте промывку до стабилизации проводимости.

5.5. Хранение мембранной хроматографии:

После использования и завершения CIP мембранный модуль можно разобрать и хранить в 20% этаноле или хранить в сети при комнатной температуре в 20% этаноле. Раствор этанола следует периодически заменять и проверять.

 

6. Информация для заказа

Q Strong Anion-Капсульный фильтр для мембранной хроматографии

	Лабораторный масштаб	небольшой масштаб	пилотный масштаб	масштаб производства
Модель продукта	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
объем мембраны	0,2 мл	5мл	400мл	5L

горячая этикетка : q сильноанионная мембранная хроматография, Китай, поставщики, производители, фабрика, оптовая торговля, оптом, на складе, бесплатный образец