Ответы на профессиональные вопросы ультрафильтрационной центробежной трубы
1. Каков мембранный материал ультрафильтрационной трубки?
Полиэфирсульфоновая мембрана обладает четким и точным перехватом молекулярной массы, стабильными физико-химическими свойствами, чрезвычайно низкой адсорбцией белка и высоким извлечением продукта
2. Если белки с разной молекулярной массой нужно разделять, насколько велика разница в молекулярной массе белков?
Два белка должны быть в 10 раз или более разными по размеру.
3. Можно ли использовать ультрафильтрационную центрифужную трубку для концентрации вируса?
Ультрафильтрационная центрифужная трубка может концентрировать вирус много раз или даже много раз. У нас есть специальная мембрана для вируса. Различные вирусы должны выбрать соответствующий размер пор мембраны
4. Можно ли дезинфицировать ультрафильтрационную центрифужную трубку и устойчивую к щелочам?
Его можно дезинфицировать 75% водным раствором этанола. Наш материал выдерживает щелочную промывку 0,1-0,5н гидроксида натрия
5. Может ли ультрафильтрационная центрифужная трубка использоваться для стерилизации под высоким давлением
У нас есть специальная ультрафильтрационная центрифужная трубка, подходящая для стерилизации под высоким давлением
6. Учитывая стабильность белка, можно ли центрифугировать ультрафильтрационную трубку при низкой температуре?
Да, наш материал устойчив к низкой температуре, но время концентрации будет дольше. Скорость фильтрации мембраны связана с температурой питательной жидкости
7. О коэффициенте восстановления
Как правило, скорость восстановления растворенных веществ с концентрацией более 0,1 мг/мл составляет 90% и более. Как правило, потеря образцов вызвана неспецифической адсорбцией на поверхности фильтрующей мембраны и поверхности материала трубы. Для того чтобы получить высокую скорость восстановления, сохраненная молекулярная масса выбранной фильтрующей мембраны составляет около 1/3 белка-мишени, ультрафильтрационная мембрана представляет собой асимметричную мембрану, ее размер пор нормально распределен, и она может протекать под центробежным высоким давлением. При этом условии белковая жидкость может деформироваться, поэтому, чем меньше апертура перехвата, тем медленнее скорость потока, но скорость восстановления будет выше.
8. Когда белок концентрируется, происходит выпадение осадков. Как с этим бороться?
Если белок концентрируется слишком быстро или слишком много, это может вызвать осаждение белка. Конечная концентрация после концентрации белка не должна быть слишком высокой; Для белков, которые чувствительны к скорости концентрации и легко выпадают в осадок, предлагаемые методы улучшения следующие:
1) Уменьшить центробежную скорость,
2) Используйте ультрафильтрационную мембрану с большей молекулярной массой
3) Дуйте и всасывайте концентрационную трубу, а затем центрифугу
9. Каковы возможные причины, по которым ультрафильтрационная центрифужная трубка не может быть центрифугирована?
Если ультрафильтрационная трубка не может быть центрифугирована, начальную центрифугирование можно проводить примерно 20% водным раствором этанола, потому что после полного высыхания ультрафильтрационной мембраны поверхность мембраны слабо гидрофобна, и флюс может быть восстановлен после замачивания растворителем с низким поверхностным натяжением.
10. Правильное использование и сохранение ультрафильтрационной трубки
Ультрафильтрационная трубка должна быть первоначально центрифугирована очищенной водой перед использованием для проверки ее целостности. После каждого использования требуется хранить его во влажном состоянии, чтобы предотвратить высыхание мембраны.
11. Как удалить эндотоксин из ультрафильтрационной трубки?
Предоставленная нами ультрафильтрационная трубка не была обработана эндотоксином. В то же время, из-за широкого распространения эндотоксинов в природе, образцы, требующие внутренних токсинов, могут быть предварительно очищены гидроксидом натрия 0,5N перед экспериментом, а затем очищены водой обратного осмоса для удаления большей части эндотоксина.
12. Когда концентрированный белок анализируется вниз по течению, обнаруживается, что существует интерференция. В чем причина?
Ультрафильтрационная трубка может быть предварительно очищена буферной или очищенной водой. Если помехи все еще существуют, очистите его гидроксидом натрия 0,1 Н, а затем очистите очищенной водой.
13. В процессе концентрации может наблюдаться неспецифическая адсорбция между белком-мишенью и ультрафильтрационной мембраной. Как его улучшить?
Мы используем гидрофильную полиэфирсульфоновую мембрану, но для некоторых белков с особыми свойствами их неспецифическая адсорбция с мембраной может быть усилена. В этом случае мы можем попробовать предварительно обработать ультрафильтрационную трубку перед экспериментом или связаться с нашим инженером.
14. После концентрации обнаруживается, что в концентрате нет белка-мишени. Каковы возможные причины?
1) Начальная концентрация белка не должна быть слишком низкой. Если концентрация слишком низкая, мембрана может не удерживаться
2) Выберите подходящий размер пор мембраны. Центрифугирование и концентрация ультрафильтрационной трубки относится к тупиковой фильтрации. Размер пор мембраны, как правило, составляет менее 2 раз или более целевого белка.
3) Выберите подходящую центробежную скорость
4) Выпадает ли в осадок белок-мишень







