Guidling Technology поможет вам изучить простой и эффективный метод опреснения и концентрирования.
Белки часто необходимо обессоливать после разделения и очистки, и эти соли в основном происходят из различных ионов живых организмов (например, ионов натрия, ионов калия, ионов хлорида и т. д.), а также буферных солей в экстрактах, солей в элюенты и солевые компоненты некоторых денатурантов, используемых в экспериментах. Высокая концентрация соли может влиять на активность и стабильность белков, а также на их взаимодействие с другими молекулами, создавая мешающие сигналы или снижая точность измерений в последующих аналитических методах, таких как электрофорез, масс-спектрометрия и кристаллографические исследования. Поэтому обессоливание очищенных белков после разделения крайне необходимо, а основными часто используемыми методами обессоливания являются мембранная (диализ и ультрафильтрация) и гель-фильтрационная хроматография. Кроме того, в некоторых случаях опреснения можно добиться и путем разбавления.
Диализное опреснение, из-за длительного цикла и необходимости большого количества замещающей жидкости, его применение сильно ограничено, и оно меньше используется в промышленности, но в основном частично используется в лаборатории, лаборатория также постепенно заменяется трубками для ультрафильтрации. /чашка для ультрафильтрации.
Основной технологией мембранного разделения, используемой в процессе обессоливания и концентрирования белков, является ультрафильтрация. Ультрафильтрация - это технология мембранного разделения с высокой эффективностью, низким энергопотреблением, отсутствием фазовых переходов, отсутствием необходимости добавления каких-либо химических реагентов, простотой эксплуатации, мягкими условиями, способностью лучше поддерживать активность биологических макромолекул, высокой скоростью восстановления и другими преимуществами. , и его использование для разделения и очистки белков имеет уникальные преимущества.
Ультрафильтрация — это метод мембранной фильтрации, который использует пористую мембрану в качестве разделительной среды и опирается на разницу давлений между двумя сторонами мембраны в качестве движущей силы для разделения веществ с разной молекулярной массой в растворе, тем самым играя роль в опреснении, концентрировании. и очищение. Это новый метод, разработанный в последние годы, который наиболее подходит для концентрирования или опреснения биологических макромолекул, особенно белков и ферментов. Ключом к применению ультрафильтрации является выбор мембраны. Различные типы и характеристики мембраны различаются по скорости потока воды, пороговому значению молекулярной массы и другим параметрам. Их необходимо выбирать в соответствии с соответствующими потребностями работы. Кроме того, на эффект ультрафильтрации определенное влияние оказывают форма устройства ультрафильтрации, состав и свойства растворенного вещества, концентрация раствора и т. д.
Применение технологии ультрафильтрации для обессоливания и концентрирования белков в процессе очистки белков характеризуется пригодностью для обработки больших количеств жидкостей объемом от нескольких сотен до нескольких тысяч литров с преимуществами простоты эксплуатации, экономии времени. и высокая скорость восстановления белка. Метод ультрафильтрации основан на ультрафильтрационных трубках для лабораторной обработки микрообъемов, чашках для ультрафильтрации для обработки небольших объемов и системах ультрафильтрации для промышленного использования.
Ультрафильтрацию подразделяют на ультрафильтрацию под прямым давлением и фильтрацию с тангенциальным потоком, и в настоящее время в промышленности в основном используется фильтрация с тангенциальным потоком, которая широко используется при опреснении и замене буфера.
Ниже приведен пример применения ультрафильтрационных мембранных кассет Guidling Technology для опреснения и концентрирования белков.
Мы использовали мембранную кассету {{0}}.11㎡ с размером пор 10 кД (G01100010K) для обессоливания и концентрирования 500 мл раствора ПЭГ-модифицированного гормона роста в концентрации 0,2 мг/мл. На протяжении всего процесса ультрафильтрации исследовали скорость опреснения, скорость восстановления белка, состояние нарушения потока мембраны и скорость восстановления потока воды.
До и после использования мы тестировали поток воды в мембранной кассете отдельно, и степень восстановления мембранных кассет достигла 98% при условии поддержания одинаковой скорости подачи, давления подачи и давления возврата.
Весь процесс обрабатывал в общей сложности 2 л материала и занял 40мин, 0-5мин — процесс концентрации, 5-35мин — процесс обмена жидкости и 35-40мин. был процесс сверхконцентрации. На протяжении всего процесса ультрафильтрации TMP стабилизировалось в пределах 0,7-0,8 бар, скорость подачи была постоянной, а средний поток материала составлял 27 лмч.
2 л материала концентрированной жидкости заменяется на 60 мл, концентрация примерно в 33 раза, степень опреснения достигает 99%, степень восстановления достигает 80%, после промывки увеличение жидкости на 50 мл, общее восстановление 88%, промышленное производство в соответствии с мертвый объем расчетов трубопровода, насколько это возможно, чтобы увеличить количество раз верхней промывки, общая верхняя промывка 3 раза может быть полностью восстановлена.
Мембранные кассеты Guidling Technology изготовлены из инертных материалов медицинского назначения, обладают высокой коррозионной стойкостью и выдерживают чистку сильной щелочью; использование автоматизированного производственного процесса обеспечивает непрерывность и надежность качества продукта, более высокую механическую прочность, устойчивость к противодавлению, возможность многократного полоскания; он обладает супергидрофильностью, что может придать мембране более высокий поток и меньшую адсорбцию белка; у нас также есть оптимизированная конструкция проточного канала с меньшим перепадом давления, что облегчает транспортировку материала и значительно сокращает время фильтрации.
Наши мембранные кассеты доступны с широким диапазоном размеров пор: от 1 до 1000 кД. Среди них ультрафильтрационные мембранные кассеты 1-10kd можно использовать для опреснения и удаления пирогенов; Мембранные кассеты для ультрафильтрации 30 кД можно использовать для концентрации моноклональных антител и замены буфера; в то же время наши изделия из полых волокон также могут использоваться для концентрации и замены биологических препаратов с размерами пор 100 кД, 300 кД и 500 кД, которые в основном используются для большого количества применений в вакцинных продуктах.
Guidling Technology — национальное высокотехнологичное предприятие, специализирующееся на биофармацевтических препаратах, культурах клеток, очистке и концентрации биомедицинских препаратов, диагностике и промышленных жидкостях. Мы успешно разработали центробежные фильтрующие устройства, кассеты для ультрафильтрации и микрофильтрации, вирусный фильтр, систему TFF, глубинный фильтр, полое волокно и т. д., которые полностью соответствуют сценариям применения биофармацевтических препаратов, клеточных культур и т. д. Наши мембраны и мембранные фильтры широко используются в процессах концентрации, экстракции и разделения предварительной фильтрации, микрофильтрации, ультрафильтрации и нанофильтрации. Наши многочисленные линейки продуктов, от небольших одноразовых лабораторных фильтров до производственных систем фильтрации, тестирования на стерильность, ферментации, клеточных культур и многого другого, отвечают потребностям тестирования и производства. Guidling Technology надеется на сотрудничество с вами!
